Apa itu Pembaca Microplate ELISA?
Pembaca lempeng mikro, yaitu, uji imunosorben terkait-enzim, adalah instrumen khusus untuk uji imunosorben terkait-enzim. Sebenarnya, ini adalah kolorimeter fotolistrik khusus atau spektrofotometer yang menyamar, dan prinsip kerjanya pada dasarnya sama dengan struktur utama dan kolorimeter fotolistrik. Secara sederhana dapat dibagi menjadi dua kategori, semi-otomatis dan sepenuhnya otomatis, tetapi prinsip kerjanya pada dasarnya sama. Intinya adalah kolorimeter, yaitu metode kolorimetri yang digunakan untuk menganalisis kandungan antigen atau antibodi. Penentuan ELISA umumnya membutuhkan volume akhir larutan uji kurang dari 250μL, dan pengujian tidak dapat diselesaikan dengan kolorimeter fotolistrik umum, sehingga ada persyaratan khusus untuk kolorimeter fotolistrik di pembaca pelat mikro.
Prinsip
Pembaca pelat mikro sebenarnya adalah kolorimeter fotolistrik tujuan khusus atau spektrofotometer yang menyamar, dan prinsip kerja dasarnya pada dasarnya sama dengan struktur utama dan kolorimeter fotolistrik. Gambar tersebut menunjukkan cara kerja pembaca pelat mikro pengambilan sampel otomatis saluran tunggal. Diagram skematik. Gelombang cahaya yang dipancarkan oleh lampu sumber cahaya diubah menjadi cahaya monokromatik oleh filter atau monokromator, dan memasuki spesimen yang diuji di kutub mikropori plastik. Bagian dari cahaya monokromatik diserap oleh spesimen, dan bagian lainnya ditransmisikan melalui spesimen. Diterangi ke fotodetektor, fotodetektor mengubah sinyal cahaya yang berbeda dari spesimen yang akan diuji menjadi sinyal listrik yang sesuai. Sinyal listrik diproses oleh pra-amplifikasi, amplifikasi logaritmik, dan konversi analog-ke-digital. Masukkan mikroprosesor untuk pemrosesan dan penghitungan data, dan terakhir tampilkan hasilnya oleh layar dan printer. Mikroprosesor juga mengontrol pergerakan mekanisme penggerak mekanis ke arah X dan arah Y untuk menggerakkan pelat mikro melalui sirkuit kontrol, sehingga mewujudkan proses deteksi pengambilan sampel otomatis. Pembaca pelat mikro lainnya menggunakan gerakan manual pelat mikro untuk deteksi, sehingga mekanisme penggerak mekanis dan rangkaian kontrol dalam arah X dan Y dihilangkan, sehingga instrumen lebih kecil dan strukturnya lebih sederhana.
Microplate adalah plat plastik transparan yang khusus digunakan untuk menempatkan sampel yang akan diuji. Pelat memiliki beberapa baris lubang kecil dengan ukuran seragam, dan antigen atau antibodi yang sesuai tertanam di dalam lubang. Setiap lubang kecil dapat menampung beberapa puluh mililiter larutan.
Cahaya adalah gelombang elektromagnetik. Panjang gelombang 100nm-400nm disebut sinar ultraviolet, cahaya antara 400nm dan 780nm dapat diamati oleh mata manusia, dan panjang gelombang yang lebih besar dari 780nm disebut cahaya inframerah. Orang hanya dapat melihat warna karena cahaya mengenai benda dan dipantulkan kembali oleh benda. Tumbuhan hijau berwarna hijau karena sebagian besar tumbuhan menyerap cahaya merah-oranye dan cahaya biru-ungu, tetapi tidak menyerap dan memantulkan warna hijau, sehingga tumbuhan tampak hijau. Prinsip pengukuran pembaca lempeng mikro adalah untuk mendeteksi absorbansi analit pada panjang gelombang tertentu.
Struktur
Ada pelat 40 sumur, pelat 55 sumur, pelat 96 sumur, dan seterusnya. Instrumen yang berbeda menggunakan pelat lubang yang berbeda, yang dapat diuji satu per satu atau baris demi baris.
Cahaya monokromatik yang digunakan oleh pembaca lempeng mikro dapat diperoleh baik melalui filter koheren atau monokromator yang sama dengan spektrofotometer. Saat menggunakan filter sebagai perangkat filter, itu sama dengan kolorimeter biasa. Itu dapat ditempatkan di depan pelat mikro atau di belakang pelat mikro. Setelah kondensor, diafragma mencapai reflektor, dipantulkan oleh reflektor pada 90 ° dan melewati larutan kolorimetri secara vertikal, dan kemudian dikirim melalui filter. Ke fotosel.
Dari diagram blok kerja dan diagram jalur cahaya dari pembaca pelat mikro, dapat dilihat bahwa ia memiliki perbedaan berikut dengan kolorimeter fotolistrik biasa:
(L) Wadah larutan kolorimetri yang akan diuji tidak lagi menggunakan kuvet, melainkan microplate plastik. Pelat mikro biasanya terbuat dari bahan polietilen transparan, yang memiliki efek adsorpsi yang kuat pada antigen dan antibodi, sehingga digunakan sebagai pembawa fase padat.
Karena pelat mikro plastik yang berisi sampel berpori banyak baris, cahaya hanya dapat melewati secara vertikal, sehingga berkas cahaya pembaca pelat mikro melewati larutan yang akan diuji dan pelat mikro secara vertikal. Berkas cahaya dapat dari atas ke bawah atau dapat melewati cairan kolorimetri dari bawah ke atas.
Pembaca pelat mikro biasanya tidak hanya menggunakan A, tetapi terkadang juga menggunakan OD densitas optik untuk menyatakan absorbansi. Pembaca pelat mikro dapat dibagi menjadi dua jenis: saluran tunggal dan saluran ganda, dan saluran tunggal dibagi menjadi dua jenis: otomatis dan manual. Jenis instrumen otomatis Ada mekanisme penggerak mekanis dalam arah X dan Y, yang dapat mengirim lubang kecil pelat mikro L satu per satu di bawah balok untuk pengujian, dan jenis manual menggunakan gerakan manual pelat mikro untuk pengukuran.
Atas dasar pembaca pelat mikro saluran tunggal, pembaca pelat mikro multi saluran telah dikembangkan. Jenis pembaca pelat mikro ini umumnya otomatis. Itu tidak memiliki banyak sinar dan beberapa fotodetektor, seperti instrumen 12 saluran dengan 12 sinar atau 12 sumber cahaya, 12 detektor dan 12 amplifier, di bawah aksi perangkat penggerak mekanis dalam arah X, 12 sampel terdeteksi dalam a baris. Kecepatan deteksi pembaca pelat mikro multisaluran cepat, tetapi strukturnya Harga yang lebih kompleks juga lebih tinggi.
Rentang aplikasi pembaca pelat mikro
Tes hematologi Tes antibodi terkait trombosit PAIgA, PAIgG, PAIgM
Penentuan D-Dimer D-Dimer
Penentuan produk degradasi fibrin serum FDP
Penentuan T3, T4 dengan triiodothyronine dan tetraiodothyronine
Tes imunologi Penentuan protein C-reaktif CRP
Penentuan imunoglobulin IgD, IgE
Penentuan kompleks imun yang bersirkulasi CIC
Penentuan faktor rheumatoid IgG, IgA, IgM RF
Antibodi anti-tiroglobulin, penentuan antibodi mikrosomal TG, TM
Deteksi imunologi kanker tumor Penentuan alfa-fetoprotein AFP
Penentuan antigen karsinoembrionik CEA
Penentuan antigen spesifik prostat PSA
Penentuan kanker pankreas, kanker saluran empedu, kanker lambung CA19-9
Penentuan kanker ovarium CA125
Penentuan kanker payudara CA15-3
Penentuan karsinoma sel skuamosa serviks SCC
Deteksi beberapa kanker sumsum tulang
Penentuan hTG cancer kanker tiroid
Tes imunologi penyakit menular, tes serologi hepatitis A, anti-HAV-IgM
Tes Serologi Hepatitis B Dua setengah pasang
Deteksi serologi hepatitis C Anti-HAV-IgG, anti-HCV-IgM
Deteksi serologis hepatitis D Anti-HDV-IgG, anti-HDV-IgM
Deteksi serologis hepatitis E Anti-HEV-IgG
Deteksi antibodi terhadap demam berdarah dengan sindrom ginjal HFRS-IgG
Deteksi antibodi virus ensefalitis Jepang IgM
Deteksi antibodi human immunodeficiency virus (yaitu, AIDS regional) HIV 2 M
Tes fungsi perawatan prenatal dan postnatal Tes virus Toxoplasma TOXO
Deteksi virus rubella RV
Deteksi sitomegalovirus CMV
Deteksi virus herpes simpleks Anti-HSV (Ⅰ, )
Orang lain juga dapat melakukan pengujian genetik dan residu hewan, item inspeksi residu pestisida, dll.
